c-Jun與Fos和其他Jun相關蛋白一起形成同型二聚體或異型二聚體結構的轉錄因子復合物AP-1。TF-Detect™ AP-1/c-Jun Activity Assay Kit可以96孔板的形式快速、靈敏的檢測人、小鼠和大鼠樣品的Ser73-磷酸化c-Jun（氨基末端活性區Ser73被磷酸化的c-Jun）。包含AP-1/c-Jun保守結合位點的雙鏈寡核苷酸被固定與96孔板上，核提取物中的c-Jun蛋白被固定化的寡核苷酸特意的捕獲。Ser73-磷酸化c-Jun可被一種磷酸化c-Jun一抗和HRP標記的二抗檢測到，由HRP底物TMB產生的比色信號很容易用分光光度法定量。用于檢測Ser73-磷酸化c-Jun的抗體同樣也可以識別Ser100-磷酸化JunD，因為保守的特異結合位點同樣存在于c-Jun and JunD上。
產品優勢
適用于多物種
- 可用于人、小鼠和大鼠
靈敏度高
- 最低可檢測0.2 µg核裂解物中的Ser73被磷酸化的c-Jun
HTS兼容
- 可采取96孔板形式進行高通量分析，也可采取單排（8孔）形式進行分析
Fast
- 從準備到檢測僅需3.5小時
c-Jun的背景
c-Jun與Fos和其他Jun相關蛋白一起形成同型二聚體或異型二聚體結構的轉錄因子復合物AP-1。AP-1結合于一種TAP反應元件（TRE），并調控基因表達以作為對生長因子、腫瘤促進劑、細胞因子等各種刺激的應答。AP-1控制著包括分化、增殖、凋亡和應激反應等細胞過程。
磷酸化作用對c-Jun進行嚴格的翻譯后調控。c-Jun具有幾個磷酸化位點，一個位于c-JUN DNA結構域附近的C端，該位點的磷酸化在靜息狀態一直了c-Jun的活性。另外兩個磷酸化位點是Ser63和Ser73，它們位于c-Jun的反式激活結構域附近。SAPK/JNKs通過對Ser63和Ser73位點的磷酸化而激活c-Jun。
實驗流程
圖1.利用TF-Detect AP-1/c-Jun Activity Assay Kit試劑盒檢測MCF-7 (左)和NIH3T3 (右)細胞核提取物中的c-Jun蛋白活性。檢測前，用紫外線照射兩種細胞20秒。按照說明書附錄中方法準備細胞核提取物。
- Lee, J. et al (2013) Interleukin‐1β enhances cell migration through AP‐1 and NF‐κB pathway‐dependent FGF2 expression in human corneal endothelial cells. Biology of the Cell, online 7 Mar 2013 DOI: 10.1111/boc.201200077. [AP-1/c-Jun Activity Kit].
