Secrete-Pair™ Dual Luminescence Assay Kit
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Secrete-Pair™ Dual Luminescence Assay Kit用于檢測雙報告系統中Gaussia Luciferase (GLuc)和Secreted Alkaline Phosphatase (SEAP)的活性。GLuc和SEAP都是分泌型蛋白，無需裂解細胞就能從培養基中獲得實驗樣本。 |
試劑盒提供兩種用于Gluc分析的緩沖液。Buffer GL-S含有穩定劑，彌補了Gluc信號快速衰退的缺點，可用于穩定活性分析。Buffer GL-H適用于檢測低表達量的Gluc活性，可以提供更高的靈敏度。
試劑盒能檢測雙報告信號并能對轉染標準化。標準化的Gluc活性可通過與未轉染的空白樣本比較獲得。
Secrete Pair™ Gaussia Luciferase Assay Kit
Secrete Pair Gaussia Luciferase Assay Kit只能用于檢測Gaussia luciferase。
Secrete Pair kits可與 GLuc-ON™啟動子報告克隆和miTarget™ miRNA 3' UTR克隆配套使用。
產品優勢
活細胞分析
- 分泌型GLuc和SEAP
- 無需裂解細胞
實驗條件更靈活
- 根據不同情況提供兩種用于Gluc活性分析的緩沖液
- 使用穩定活性緩沖液可以在實驗開始10分鐘內保證90%以上的信號，并能延長發射光的半衰期30分鐘以上
- 靈敏度高的緩沖液可以檢測低表達量的GLuc
實時研究
- 快速獲得實驗數據
- 與實時活性研究類似
雙報告系統檢測
- 檢測GLuc和SEAP
- 實現轉染標準化，可用于樣本間的比較
高通量兼容
- 快速簡便的分析模式
- 可檢測大量樣品
載體選擇
GeneCopoeia 提供Gaussia luciferase(Gluc)報告載體，可供廣大研究者自由操作；只需將目的片段插入報告載體，即可應用熒光素酶檢測試劑。 點擊載體名稱可查看載體圖譜信息。
| 貨號 | 載體 | 啟動子 | 報告基因 | 示蹤基因 | 篩選標記 | 抗性 | 載體類型 |
| ZX101 | pEZX-GN01 | N/A* | Gluc | N/A* | Puromycin | Kan | Non-viral |
| ZX102 | pEZX-GN03 | miniCMV | Gluc | N/A* | Puromycin | Kan | Non-viral |
| ZX103 | pEZX-GA01 | N/A* | Gluc | Secreted alkaline phosphatase (SEAP) | Puromycin | Kan | Non-viral |
| ZX104 | pEZX-GA02 | SV40 | Gluc | Secreted alkaline phosphatase (SEAP) | Neomycin | Amp | Non-viral |
| ZX105 | pEZX-GA03 | miniCMV | Gluc | Secreted alkaline phosphatase (SEAP) | Puromycin | Kan | Non-viral |
| ZX106 | pEZX-LvGN01 | N/A* | Gluc | N/A* | Puromycin | Amp | Lentiviral |
| ZX107 | pEZX-LvGA01 | N/A* | Gluc | Secreted alkaline phosphatase (SEAP) | Puromycin | Amp | Lentiviral |
* A separate vector is available for SEAP expression.
操作流程
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Figure 1.不同緩沖體系中GLuc的信號穩定性比較。細胞轉染人類Gluc報告基因克隆后收集細胞培養物，每個反應10μl。根據試劑盒的實驗步驟進行操作，對每個試劑盒中兩種緩沖體系進行測試，獲得的信號百分比（Y軸）作為信號穩定性的指標。實驗結果如圖所示，在兩種試劑盒中（Secrete-Pair和競爭者Gaussia luciferase assay kit），含有穩定劑（-S）的緩沖體系中Gluc的活性比不含穩定劑(-H)的緩沖體系中穩定。不僅如此，Secrete-Pair試劑盒緩沖體系中Gluc信號比競爭者試劑盒中穩定性更高（實驗開始10分鐘內近90%的信號可被捕獲）。 |
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Figure 2. GLuc和SEAP分析。細胞轉染GLuc-SEAP雙報告基因克隆后收集細胞培養物，每個反應10μl。反應初期，GL-H緩沖液中wtGLuc活性比GL-S緩沖液中高3-5倍。但GL-S緩沖液中GLuc活性更穩定。
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